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一种杀真菌农用抗生素及其制备工艺.pdf

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一种 真菌 农用 抗生素 及其 制备 工艺
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摘要
申请专利号:

太阳城集团CN200610139147.4

申请日:

20050316

公开号:

CN1994086A

公开日:

20070711

当前法律状态:

有效性:

失效

法律详情:
IPC分类号: A01N43/90,A01P3/00 主分类号: A01N43/90,A01P3/00
申请人: 吴元华
发明人: 吴元华
地址: 110161辽宁省沈阳市东陵路120号沈阳农大植保学院
优先权: CN200610139147A
专利代理机构: 沈阳智龙专利事务所 代理人: 宋铁军
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法律状态
申请(专利)号:

太阳城集团CN200610139147.4

授权太阳城集团号:

法律状态太阳城集团日:

法律状态类型:

摘要

本发明属于农药生产技术领域,特别是涉及一种可产生杀真菌的农用抗生素制备工艺和用途。该抗生素生产菌株为杀真菌素链霉菌,它的菌种保藏编号为CGMCC NO.1247;其产生的抗生素属四烯类抗生素,其分子式为C35H53NO13,其分子量为695;该化合物用作防治农作物真菌病害。它的发酵工艺如下步骤依次进行:1.菌种扩繁过程;将斜面菌种接种于种子罐培养40小时~50小时,温度控制在26℃~32℃,pH值6.0~8.0,罐压在0.05~0.2MPa,灭菌30分钟备用;2.发酵抗生素生成过程;3.发酵后处理。本发明的目的在于能有效控制多种植物真菌病害,同时能保障人畜安全和保护环境。本产品具有性能稳定低毒,对人、畜无毒害,预防和治疗植物真菌病害效果显著等优点。

权利要求书

1、一种杀真菌农用抗生素,其特征在于:它的化学结构式为: 其分子式为CHNO,其分子量为695。2、一种如权利要求1所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:该工艺按如下步骤依次进行:(A)菌种扩繁过程:采用杀真菌素链霉菌(Streptomyces fungicidicusYh06),它的菌种保藏编号为CGMCC NO.1247,在种子罐中加入下列基础培养成分,按重量百分含量计:花生饼粉    2.0~4.0;大豆饼粉    2.0~5.0;玉米粉      1.0~4.0;玉米浆      0.4~1.2;酵母浸粉    0.02~0.1;碳酸钙      0.1~0.3;氯化钠      0.1~0.5;硫酸铵      0.05~1.2;硫酸锌      0.01~0.06;硫酸镁      0.01~0.06;其余含量为水,灭菌30分钟备用;培养条件:在种子罐中培养40小时~50小时;其温度控制在26℃~30℃,pH值6.0~8.0,罐压控制在0.05~0.2Mpa;(B)发酵抗生素生成过程:将A步骤种子罐中形成的培养液送入发酵罐进行发酵;在发酵罐内主要加入下列培养基,按重量百分含量计:花生饼粉    2.0~4.0;大豆饼粉    2.0~5.0;玉米粉      1.0~4.0;玉米浆      0.2~1.0;酵母浸粉    0.1~0.5;碳酸钙      0.1~0.3;氯化钠      0.1~0.5;硫酸铵      0.05~0.2;硫酸锌      0.01~0.06;其余含量为水,灭菌30分钟备用;在上述物料放入发酵罐后,灭菌前调整pH值使其控制在6.0~8.0;培养时罐压控制在0.05~0.2MPa,空气流量:1:(0.2~1.0),培养温度为26~30℃,太阳城集团为40小时~50小时;(C)发酵后处理,按以下步骤依次进行:1)放罐前,管道预先进行消毒;2)对发酵液进行加热使其温度达到80~100℃,维持10分钟,之后迅速冷却;3)用浓度为6N的盐酸调整发酵液的pH值使其控制在3.5~5.0;再将发酵液进行过滤,过滤得清液;4)将清液抽入到浓缩罐中,在700mmHg真空度,蒸汽压0.02~0.06MPa,温度在60℃~80℃条件下进行减压浓缩,使浓缩液效价控制在15000单位/ml以上;5)加入稳定剂、助剂后得成品。3、根据权利要求2所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:由种子罐送入发酵罐的上罐接种量为8%~15%(V/V),菌株在种子罐的培养太阳城集团为40~50小时。4、根据权利要求3所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:种子罐和发酵罐中均加入玉米油0.5~0.8/万(V/V)和硅酮消泡剂0.5~0.8/万(V/V)。5、根据权利要求3所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:发酵后处理步骤中,稳定剂采用苯甲酸和硫酸铜,助剂为Toween80;按重量百分含量计苯甲酸加入浓缩液的0.1%~0.4%,硫酸铜为浓缩液的1%~2%,Toween80按重量百分含量计是浓缩液的0.1%~0.5%。6、一种如权利要求1所述的杀真菌农用抗生素的用途,其特征在于:该化合物用作防治和治疗植物的真菌病害。

说明书

一种杀真菌农用抗生素及其制备工艺

一、技术领域:

本发明属于农药生产技术领域,特别是涉及一种可产生杀真菌的农用抗生 素制备工艺和用途。

二、背景技术:

农药是保证农作物稳产、高产,解决世界粮食问题不可缺少的重要物资, 同时也是一个能获得巨大经济利益和社会效益的产业。然而,化学农药残留所 引起的环境污染、人畜中毒、病原菌或害虫抗药性增强等问题日趋严重,大力 研究、开发、生产和应用生物农药,已成为全球农药产业发展的新趋势。目前 世界各国正在采取实际步骤减少化学农药的使用,如美国环保局曾宣布撤销 91种化学农药的登记;欧盟制定了减少一半化学农药使用量的五年和十年计 划,并禁止在直接入口的瓜果蔬菜等农产品生产中使用化学农药。我国也已将 发展生物农药和绿色食品列入《中国21世纪议程》。因此,研究和开发高效、 低毒、与环境兼容性良好、病虫害不易产生抗性的新型农用抗生素将会具有更 加广阔的市场前景。

农用抗生素作为生物农药中的重要类群,较其它生物农药具有更高效、快 速、安全等优点。自1958年日本成功开发出灭瘟素并用于防治稻瘟病以来, 日、美、英、法等国相继开展了农用抗生素的研究与开发工作,并取得很大的 成就。随着科学技术的发展和国际学术交流的日益频繁,我国在农用抗生素方 面的研发工作取得很大的成就。也开发出一些拥有自主知识产权、高效、广谱 的农用抗生素如井冈霉素、中生菌素、公主岭霉素、农抗120等,且均在农作 物病虫害防治工作中发挥着重要作用。但是,目前我国生物农药的市场占有率 仅有2%~3%,其潜力远没有得到充分的开发和应用。

太阳城集团现有的农用抗生素主要用于水稻、小麦等大田农作物的病虫害防治,而用 于防治蔬菜和果树上的特别是真菌病害如黄瓜霜霉病、枯萎病、番茄叶霉病、 灰霉病、辣椒疫病、葡萄黑痘病等的生物农药则相对较少,因此,针对蔬菜和 果树上的重要病害,研究和开发广谱高效的新型农用抗生素,在我国乃至国际 上都有着十分重要的意义,本项发明就是在此背景下创制的。

三、发明内容:

1、发明目的:本发明提供一种产生杀真菌农用抗生素的菌株及其发酵工 艺,其目的在于能有效控制植物真菌病害,同时能保障人畜安全和保护环境。

2、技术方案:本发明是通过以下技术方案来实现的:

一种杀真菌农用抗生素,其特征在于:它的化学结构式为:

太阳城集团其分子式为C35H53NO13,其分子量为695。

该农用抗生素的制备工艺,其特征在于:该工艺按如下步骤依次进行:

(A)菌种扩繁过程:采用杀真菌素链霉菌Streptomyces fungicidicus Yh06,它的菌种保藏编号为CGMCC NO.1247,在种子罐中加入下列基 础培养成分,按重量百分含量计:

花生饼粉       2.0~4.0;

大豆饼粉       2.0~5.0;

玉米粉         1.0~4.0;

太阳城集团玉米浆         0.4~1.2;

太阳城集团酵母浸粉       0.02~0.1;

碳酸钙         0.1~0.3;

氯化钠    0.1~0.5;

硫酸铵    0.05~1.2;

硫酸锌    0.01~0.06;

太阳城集团硫酸镁    0.01~0.06;

其余含量为水,灭菌30分钟备用;

太阳城集团培养条件:在种子罐中培养40小时~50小时;其温度控制在26℃~30 ℃,pH值6.0~8.0,罐压控制在0.05~0.2Mpa;

(B)发酵抗生素生成过程:将A步骤种子罐中形成的培养液送入发酵罐进 行发酵;在发酵罐内主要加入下列培养基,按重量百分含量计:

太阳城集团花生饼粉    2.0~4.0;

太阳城集团大豆饼粉    2.0~5.0;

玉米粉      1.0~4.0;

玉米浆      0.2~1.0;

太阳城集团酵母浸粉    0.1~0.5;

太阳城集团碳酸钙      0.1~0.3;

太阳城集团氯化钠      0.1~0.5;

硫酸铵      0.05~0.2;

硫酸锌      0.01~0.06;

其余含量为水,灭菌30分钟备用;

在上述物料放入发酵罐后,灭菌前调整pH值使其控制在6.0~8.0;培养 时罐压控制在0.05~0.2MPa,空气流量:1∶(0.2~1.0),培养温度26~30 ℃,太阳城集团为40小时~50小时;

太阳城集团(C)发酵后处理,按以下步骤依次进行:

1)放罐前,管道预先进行消毒;

2)对发酵液进行加热使其温度达到80~100℃,维持10分钟,之后迅速 冷却;

太阳城集团3)用浓度为6N的盐酸调整发酵液的pH值使其控制在3.5~5.0;再将发 酵液进行过滤,过滤得清液;

太阳城集团4)将清液抽入到浓缩罐中,在700mmHg真空度,蒸汽压0.02~0.06MPa, 温度在60℃~80℃条件下进行减压浓缩,使浓缩液效价控制在15000单位/ ml以上;

5)加入稳定剂、助剂后得成品。

所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:由种子罐送入发酵罐 的上罐接种量为8%~15%(V/V),菌株在种子罐的培养太阳城集团为40~50小时。

所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:种子罐和发酵罐中均 加入玉米油0.5~0.8/万(V/V)和硅酮消泡剂0.5~0.8/万(V/V)。

所述的杀真菌农用抗生素的制备工艺,其特征在于:发酵后处理步骤中, 稳定剂采用苯甲酸和硫酸铜,助剂为Toween80;按重量百分含量计苯甲酸加 入浓缩液的0.1%~0.4%,硫酸铜为浓缩液的1%~2%,Toween80按重量百分 含量计是浓缩液的0.1%~0.5%。

太阳城集团所述的杀真菌农用抗生素的用途,其特征在于:该化合物用作防治和治疗 植物的真菌病害。

3、优点及效果:本发明具有稳定的原料来源,且成本低,适合大规模工 业化生产,如发酵配方中所采用的原料主要有玉米淀粉、花生饼粉、酵母粉、 葡萄糖等。产品质量稳定。在保证原料稳定的同时,可以通过严格控制各项 发酵参数,来控制成品的质量,从而形成科学完整的质量体系,该产品对光、 热、酸等稳定,浓缩液在常温下保存2年不失效。本产品低毒,对人、畜无 毒害,对农作物无药害,不刺激皮肤、眼等,耐雨水冲刷。防治植物真菌病 害效果明显。据辽宁省几个市、县及北京、吉林、黑龙江等地蔬菜、烟草、 玉米等作物大田试验。

四、具体实施方式:本发明是采用以下方案实施的:

实施例1:

一种可产生杀真菌的农用抗生素的菌株,其学名为杀真菌素链霉菌 Streptomyces fungicidicus Yh06,它的菌种保藏编号为CGMCC NO.1247;该菌 株细胞壁属于氨基酸I型,其全细胞糖类型属于糖型C。该菌株在高氏一号、 克氏一号、PDA、葡萄糖酵母琼脂、瓦氏肉汁琼脂培养基上生长良好;在高 氏一号培养基上气生菌丝和孢子堆在生长初期呈白色,之后逐渐变成灰色或 浅灰色,基内菌丝多为黄色或浅黄色,可溶性色素黄色、浅黄色;气生菌丝 柔直、末端略微弯曲,孢子丝呈链状;孢子球型或卵圆形,表面光滑;该菌 株明胶液化较强,能使牛奶凝固且胨化,能在纤维素上生长但不分解,水解 淀粉,不产生类黑色素和硫化氢,可利用葡萄糖、果糖、蔗糖、鼠李糖、乳 糖、麦芽糖、阿拉伯糖、淀粉、柠檬酸钠和肌醇等碳源,不能利用棉子糖。

太阳城集团采用该菌株生产一种农用抗生素,其化学结构式为:

其分子式为:C35H53NO13,其分子量为695,抗生素属四烯类抗生素。

上述杀真菌农用抗生素的发酵工艺,其特征在于:可按如下步骤依次进行:

(A)菌种扩繁过程:

太阳城集团采用杀真菌素链霉菌(Streptomyces fungicidicus Yh06),在种子罐中加入 下列基础培养成分,按重量百分含量计:

花生饼粉    4.0;

大豆饼粉    2.0;

玉米粉      2.0;

太阳城集团玉米浆      0.4;

太阳城集团酵母浸粉    0.03;

太阳城集团碳酸钙      0.15;

太阳城集团氯化钠      0.15;

硫酸铵      0.05;

硫酸锌      0.01;

硫酸镁      0.01;

其余含量为水,灭菌30分钟。

太阳城集团培养条件:在种子罐中培养30小时~40小时;其温度控制在26℃~30 ℃,pH值6.0~7.0,罐压控制在0.05~0.2MPa,

太阳城集团(B)发酵抗生素生成过程:将A步骤形成的种子培养液送入发酵罐,上罐 接种量为10%~15%(V/V);在发酵罐内主要加入下列培养基,按重量百分 含量计:

花生饼粉    4.0

太阳城集团大豆饼粉    3.0;

玉米粉      1.0;

玉米浆      0.2

酵母浸粉    0.15;

太阳城集团碳酸钙      0.2;

氯化钠      0.2;

硫酸铵      0.05;

硫酸锌      0.06

其余含量为水,灭菌30分钟备用。

太阳城集团在上述物料放入发酵罐后,灭菌前调整pH值使其控制在6.0;培养时罐压 控制在0.05MPa,空气流量:1∶0.5,培养温度为28℃,太阳城集团为45小时,发 酵罐中加玉米油0.5/万(V/V)和硅酮消泡剂0.5/万(V/V)。

(C)发酵后处理,按以下步骤依次进行:

1)放罐前,管道预先进行消毒;

2)对发酵液进行加热使其温度达到100℃,维持10分钟,之后迅速冷却;

3)用浓度为6N的盐酸调整发酵液的pH值使其控制在3.5;再将发酵液 进行过滤,过滤得清液;

太阳城集团4)将清液抽入到浓缩罐中,在700mmHg真空度,蒸汽压0.02MPa,温 度在65℃条件下进行减压浓缩,使浓缩液效价控制在15000单位/ml以上;

5)加入稳定剂、助剂后得成品。稳定剂采用苯甲酸和硫酸铜,助剂为 Toween80。按重量百分含量计苯甲酸加入浓缩液的0.2%,硫酸铜为浓缩液的 2%,Toween80按重量百分含量计是浓缩液的0.1%。

实施例2、

试验地选择在沈阳市东陵区英达乡生产农户保护地番茄的农户。该农户生 产番茄已有7年的历史,早春季节的叶霉病、灰霉病、早疫病等已成为常发病 害。试验在2003和2004年每年进行了2次。采用本发明的杀真菌农用抗生素, 这两年基本无上述病害的发生。此外,在辽宁、山东等几个地方的试验田内实 施,发现该杀真菌农用抗生素还具有对黄瓜霜霉病、枯萎病、辣椒疫病、葡萄 黑痘病等都具有治疗和预防的作用,说明其具有广谱的、抑杀真菌的作用。

最后需要说明的是这种可产生杀真菌的农用抗生素的菌株,其保藏在中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京海淀区中关村北一条 13号,中国科学院微生物所,保藏日期为2004年11月22日。

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